Infecções fúngicas são importantes causas de morbidade e mortalidade. Atualmente existem diferentes terapias com agentes antifúngicos utilizadas para controle destas infecções, contudo a tolerância microbiana a esses agentes tem aumentado. Por esse motivo nosso grupo tem avaliado a atividade antifúngica de microcristais contendo prata bem como sua citotoxicidade sobre células humanas (fibroblasto gengival humano - FGH - e queratinócitos orais normais espontaneamente imortalizados - NOK-si). Os resultados obtidos até o momento demonstraram que os microcristais testados (alfa tungstato de prata - ±-Ag2WO4, beta molibdato de prata - ²-Ag2MoO4 e alfa vanadato de prata - ±-AgVO3) apresentaram atividade fungicida e fungistática contra Candida albicans e, ao mesmo tempo, não apresentaram citotoxicidade sobre as células humanas testadas. Contudo, existem lacunas importantes sobre a biocompatibilidade dos microcristais que devem ser cuidadosamente investigadas como a capacidade de indução de resposta inflamatória e degradação de metaloproteinases de matriz (MMPs). O entendimento de tais respostas é fundamental para assegurar uma melhor compreensão dos mecanismos de resposta inflamatória e regeneração tecidual frentes a estes novos materiais. Assim, este projeto visa avaliar a expressão de citocinas pró-inflamatórias (IL-1², IL-6, IL-8 e TNF-±) e MMPs (-8 e -9) em culturas de células em monocamada e em epitélio oral humano reconstituído (RHOE) após a exposição às concentrações inibitórias e fungicidas dos microcristais (±-Ag2WO4, ²-Ag2MoO4 e ±-AgVO3). Para avaliar a viabilidade celular e ou tecidual serão realizados ensaios de Alamar Blue. Em seguida serão realizados os ensaios de qPCR (para avaliação da expressão gênica das citocinas e MMPs); citometria de fluxo (para quantificação das citocinas solúveis); Western Blot (para quantificação das MMPs solúveis); e zimografia (para avaliação da atividade enzimática das MMPs). Os resultados obtidos serão submetidos à análise estatística com auxílio do software GraphPad Prism 5. Será adotado um nível de significância de 5%. (AU)

A formação de biofilme em superfícies de abutments é, atualmente, considerada um dos principais responsáveis pela perda dos implantes após o processo de osseointegração. Uma vez que as bactérias se aderem as superfícies e desenvolvem uma comunidade complexa com a produção da matriz extracelular, as células microbianas se tornam tolerantes aos antibióticos e às defesas do indivíduo. A qualidade da adesão dos micro-organismos à uma superfície é influenciada por elementos químicos presentes na camada externa das bactérias e pelas propriedades físico-químicas inerentes a cada material, tais como composição química, energia livre de superfície, hidrofilicidade e topografia. Com o objetivo de controlar a formação de biofilmes sobre esses materiais, nanopartículas de prata (AgNPs) vem sendo desenvolvidas para recobrir as superfícies destes componentes protéticos. Contudo, a literatura científica também tem relatado que, além de algumas espécies de bactérias Gram-positivas serem menos susceptíveis a estes nanomateriais, a prata pode ser tóxica para as células humanas, dependendo da concentração. Diante deste quadro, e com o objetivo de melhorar as propriedades antimicrobianas e, ao mesmo tempo, reduzir a quantidade de prata disponível no ambiente oral, nosso grupo de pesquisa tem avaliado microcristais de tungstato de prata (±-Ag2WO4) e molibdato de prata (²-Ag2MoO4). Nossos resultados preliminares foram promissores em relação à atividade antimicrobiana dos materiais em questão, assim como em relação a ausência de citotoxicidade destes micro-cristais. Como um avanço na aplicação destes compostos, estamos utilizando estes materiais para criar um novo tipo de superfície para abutments de implantes no sentido de prevenir a doença peri-implantar. Para isto, uma análise complexa e completa dos efeitos destes microcristais como materiais antimicrobianos e não tóxicos para células e tecidos será realizada. (AU)